磷酸化抗体检测要注意什么

磷酸化抗体其实就是做磷酸化蛋白质的检测，但是对于它的一个检测问题，其实很多人都不太认识和了解，那么下面就为大家具体介绍一下，磷酸化抗体一些检测问题，只有我们对这些常识有一些科学的认识，那么在生活当中出现这种情况的时候，才不会手足无措。

做磷酸化蛋白质的检测，在裂解液中一定要加入磷酸酶抑制剂，防止其将磷酸化的蛋白质去磷酸化。关于磷酸化蛋白质的检测我想说明一下几点：

1、组织的制备一定要在冰上操作，而且速度要快。如果不是立刻配置样品最好先放在液氮里冷冻起来，哪怕两个小时之后再制备样品也有必要如此，因为磷酸化的蛋白质很容易分解。

2、组织裂解液一定要加入磷酸酶抑制剂。最好能够多加一些蛋白酶的抑制剂。防止各种酶水解蛋白质。否则，不仅磷酸化的测不出，总蛋白质也很难测出来。

3、测磷酸化蛋白质，上样量可以大一些，以加载量比较大的目标分子。

4、一抗和二抗的孵育时间都可相应延长，我曾经做过一抗孵育5小时（常温），二抗2小时的试验，结果很漂亮。

5、 推荐大家用发光剂显影法，这样灵明度要高一些。

6、压片时间可以相应的延长。

以上就是关于磷酸化抗体的介绍，希望通过这些介绍，大家对这种常识，有科学的认识，在生活当中，其实我们更多的了解这些常识，也是为了帮助我们保证健康，避免一些不利影响的发生，每个人都应该注重这些认识。